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大家好,小跳来为大家解答以上的问题 。范县濮城人口，反向pcr扩增质粒这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧！
1、设计一对引物 ， 针对基因两端（覆盖酶切位点） ， 在上游引物中酶切位点后的一段序列中添加一个碱基 ， 扩增以后，酶切产物和空载体，再连接一遍，转化，小提拿去测序 。
2、最好上游换另一个内切酶位点，这样方便双酶切检测 ， 区别于原来的质粒 。
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