皮肤一碰就碎，全身都是伤口：为了治疗，他们被迫给皮肤涂满病毒( 二 ) _健康小知识

基因缺陷会为患者带来终身的病痛，而斯坦福大学的研究团队也希望通过基因疗法帮助患者减轻痛苦，特别是RDEB患者（来自隐性致病突变）。想让功能有缺陷的皮肤，重新获得生产C7蛋白的能力，最直接的思路就是把正常的基因传送过去。
这时候，病毒就派上了用场。在病毒DNA里插入有用的基因，再让它去感染皮肤细胞，细胞也就能用上那个基因了。不过在此之前，载体病毒的选择很重要。
科学家用的是1型单纯疱疹病毒（HSV-1）。编码C7蛋白的COL7A1基因很大，有大约9000个碱基对，载体病毒必须容纳这个基因，而HSV-1可以胜任。再者， HSV-1进入细胞核后，不会把自己的DNA插入宿主染色体，宿主的基因组就不会因为被插入而出现危险的变异。

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1型单纯疱疹病毒感染有时会引起唇疱疹，但大多感染者未必会经历（图片来源：BotMultichill）
除此之外，全球大约67%的人类携带这种病毒，但绝大多数情况下HSV-1都能在人体内安静潜伏下来，不引起任何症状。这表示HSV-1能有效躲避免疫反应，不被机体清除，更有机会完成科学家给它的使命。
而研究团队除了要把目标基因插入病毒DNA ，还要对病毒DNA进行额外的编辑，让它进入细胞核后难以复制，难以传播到身体的更多部位。只有得到这样的病毒，才能用它去感染皮肤细胞。
第一步是体外实验。科学家在体外环境下，用基因编辑后的HSV-1病毒感染了一些RDEB患者的皮肤细胞，其中既有来自表皮的角质生成细胞（keratinocytes），也有来自真皮的成纤维细胞（fibroblasts）。实验证明，这些细胞生产C7蛋白的能力明显增强了。
第二步，科学家把这种方法用在了小鼠体内。实验用的小鼠也是Col7a1_flNeo隐性纯合子，这种基因型的小鼠，产生的C7蛋白只有正常小鼠的10% 。研究团队在小鼠背部的四个点进行了皮内注射，让携带目标基因的HSV-1病毒进入小鼠的皮肤。
结果，在注射后的第三天，表皮真皮连接处检测到了C7蛋白的线性分布；而到了第七天，科学家已经在大片的皮肤上，发现这种蛋白质的广泛连续线性分布。也就是说，在小鼠身上注射病毒后， C7蛋白的表达显著上升了。
第三步，就是对这种基因疗法进行临床试验。
让伤口完全闭合
科学家进行了一期与二期临床试验。一期主要评估基因疗法的安全性，和C7蛋白的生产力；二期主要评估疗法对伤口愈合的影响。团队一共招募了9位患者，其中三位是儿童（6岁以上）。他们都被诊断为全身性RDEB 。
这些参与者接受的治疗方案与小鼠有所不同，把皮内注射换成了在伤口处涂抹凝胶，不过当中依然含有携带COL7A1基因的HSV-1病毒，以帮助患者生成C7蛋白。每1~3天涂抹一次伤口，疗程为期25天，同时用不含病毒的安慰剂凝胶涂抹另一处伤口，作为对照。

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左为治疗前，右为治疗完成3个月后的愈合结果（图片来源：原论文）
在这些患者当中，并没有出现安全性问题报告，胶原蛋白的表达增强也符合团队的预期。至于伤口愈合情况，实验组除了一个伤口之外，其他伤口都在治疗结束后的3个月之内完全闭合了；而唯一的例外，是一个已有5年历史的慢性伤口，它在治疗后的一个月内仅有部分闭合，不过经历了第二个25天疗程后，也实现了完全闭合，并且维持了8个月。
相比之下，安慰剂凝胶有时也能产生一定的修复效果，但没有病毒凝胶那样明显，且维持不了多久。