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大家好,小跳来为大家解答以上的问题 。t载体克隆原理,t载体这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧!
1、T载体又叫T质粒载体 , 是指T4噬菌体DNA连接酶,作用是在有Mg2 、ATP存在的连接缓冲系统中,将分别经酶切的载体分子与外源DNA分子进行连接 。
2、DNA连接酶有两种:T4噬菌体DNA连接酶和大肠杆菌DNA连接酶 。
3、两种DNA连接酶都有将两个带有相同粘性末端的DNA分子连在一起的功能,而且T4噬菌体DNA连接酶还有一种大肠杆菌DNA连接酶没有的特性 , 即能使两个平末端的双链DNA分子连接起来 。
4、T4噬菌体DNA 连接酶催化DNA 连接反应分为3 步:首先,T4 DNA 连接酶与辅因子ATP形成酶-ATP复合物;然后,酶-ATP复合物再结合到具有5’磷酸基和3’羟基切口的DNA上,使DNA腺苷化;最后产生一个新的磷酸二酯键,把切口封起来 。
5、连接反应通常将两个不同大小的片断相连 。
6、形象的说 , DNA水解酶相当于剪刀,剪断DNA,而T载体(DNA连接酶)就相当于针线 。
7、如果克隆时不用,就不能将DNA连接起来 。
【t载体 t载体克隆原理】本文到此分享完毕,希望对大家有所帮助 。
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