鲁勇|《自然》子刊：全面消除肿瘤中的免疫抑制细胞，终于实现了！ -Dye|Treg|细胞|处理|现象|肿瘤

免疫检查点抑制剂（ICB）目前已经应用于多种肿瘤的临床治疗中，但是，很多对ICB有反应的肿瘤在治疗后期会出现耐药现象。
出现这种现象的原因之一是，肿瘤微环境中存在大量免疫抑制性细胞，如髓源性免疫抑制细胞（MDSC）、肿瘤相关巨噬细胞（TAM）和调节性T细胞（Treg）等，它们会显著抑制细胞毒性淋巴细胞（CTL）的浸润和功能，导致肿瘤继续生长。
但是目前并不清楚免疫抑制性细胞具体是如何导致ICB获得性耐药的，也没有去除这群细胞的特异性干预手段和药物。
近日，美国北卡罗来纳州维克森林浸信会健康综合癌症中心的鲁勇团队，在《自然》旗下著名子刊《自然·生物医学工程》杂志上发表重要研究成果[1] 。
他们通过数据库筛选出在免疫抑制性细胞上特异表达的基因Nt5e（编码CD73蛋白）。他们设计了IR-700染料偶联的光敏抗CD73抗体，靶向杀伤表达CD73分子的肿瘤浸润免疫抑制性细胞，从而显著改善ICB治疗耐药现象。
据了解，这项研究首次实现了全面消除肿瘤中浸润的免疫抑制性细胞，找到了一个克服ICB治疗中获得性耐药的有效策略，具有重要的转化意义，为将来临床试验奠定了重要的基础。

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▲ 论文首页截图
ICB能够使肿瘤特异性T细胞重新活化，恢复它杀伤肿瘤的能力，因此这个疗法广泛应用于多种肿瘤的临床治疗中。遗憾的是， ICB治疗效果十分有限，比如在三阴性乳腺癌（TNBC）中有效率仅有4.7%；而且部分肿瘤还存在获得性耐药现象，在治疗后期肿瘤重新生长变大。
肿瘤中浸润的免疫抑制性细胞是肿瘤对ICB治疗耐药的重要推手，它们会抑制CD8+T细胞功能，促使肿瘤生长。目前也有一些削弱这群细胞抑制T细胞功能的方法，但往往缺乏特异性，无法保证其他免疫细胞不受影响。
为了解决这些问题，鲁勇团队再次把目光集中到肿瘤中浸润的免疫抑制性细胞，他们从已发表的微阵列数据库[2-4]中筛选出11个基因，相比于其他免疫细胞，这11个基因在免疫抑制性细胞中特异性高表达，其中表达差异倍数最高的是基因Nt5e（编码CD73蛋白）。
通过流式细胞技术分析，鲁勇团队发现： CD73分子不仅在免疫抑制性细胞上高表达，在一些肿瘤细胞（如4T1.2 ， EMT6）中也会表达，但是在CTL、NK及DC细胞中几乎不表达。

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▲ 基因Nt5e（红色）在免疫抑制性细胞中高表达
在免疫抑制性细胞上找到特异性表达的分子之后，鲁勇团队就想：如果能特异性杀死这些细胞，或许就能消除肿瘤的免疫逃逸。
因此，他们通过一种现有的近红外（NIR）光耗竭靶细胞的方法，设计了一种IR-700染料偶联的抗CD73单克隆抗体（αCD73-Dye偶联物）。实验结果表明， αCD73-Dye偶联物能够与CD73 + 细胞特异性结合，并在NIR（690nm）暴露下高选择性地诱导CD73+ 细胞坏死性死亡，而不会损坏相邻细胞。
那么这个抗体的真实杀伤力怎么样呢？
体外实验结果显示，在NIR的作用下， αCD73-Dye能够快速杀伤免疫抑制性细胞，以及表达CD73分子的肿瘤细胞。
体内实验结果显示，αCD73-Dye+NIR处理能够显著降低肿瘤中Treg ， MDSC及TAM.M2等免疫抑制性细胞浸润，同时明显提高肿瘤浸润CD8 + T细胞占比，重新塑造肿瘤中免疫细胞的浸润比例。