pgl3basic载体图谱 _经验分享

如何利用pGL3质粒验证一段DNA序列是否具有启动子活性?可以将pcr扩增好的DNA序列通过酶切连接的方式插入到pGL3载体的多克隆位点，拿到重组载体后，转化细胞，检测荧光变化，如果荧光比值明显增大，说明这一段DNA具有启动子活性。
空载pgl3-basic双荧光素酶会表达吗将构建pCMV-Luc和pTK-Luc以及商品化的pGL3-control（SV40启动子驱动）,分别与SV40（pBIND）和TK（pRL-TK）两种启动子驱动的两种内参质粒共转染入HEK293细胞;观察过表达组成性活化NFAT后相对荧光素酶活性读数的改变。
结果：成功。

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求助pGL3-basic质粒Sanger测序引物选择先连接T载体是为了提高转化效率一般来说市面上出售的T载体都进行了优化，容易连接片段（也就是效率较高），因此构建表达载体时有时会先连接T载体。
同时T载体的测序引物比较明确（商业化的缘故），因此测序也方便一些。
更重要。
PGL3-basic Vector 中有EcoR I酶切位点吗可以下载PGL3-basic Vector的technical mannual (Part# TM033)在第18页上，可以查到一个表格：Table 4. Restriction Enzymes That Cut the pGL3-Basic Vector Between 1 and 5 Times.从这个列表上看，这个载体上没有EcoRI 。

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PGL3 promoter和enhancer用途上的区别?【pgl3basic载体图谱】在说明书上看图谱上的区别但是还是不是很理解什么时候选用 PGL3 promo 。PGL3 promoter就是用于插入自己的enhancer证明enhancer作用的 PGL3 enhancer是用来插入自己的promoter做promoter实验的，所以promoter实验用pGL3-basic其实也是可以的