Schmid|GUT：“癌王”越化疗越“强”的原因竟是这样！( 二 ) 细胞|负荷|药物|化疗|患者|中性

有趣的是，只在有吉西他滨的条件下，无中性粒细胞小鼠出现转移灶负荷减小的现象，而在没有吉西他滨治疗的条件下转移灶负荷没有任何改变。但是，无巨噬细胞小鼠，不管在有没有吉西他滨治疗的条件下，都会大幅地降低转移灶的负荷。
这些结果表明，巨噬细胞和中性粒细胞都会对胰腺癌的转移起到重要作用，而中性粒细胞只对化疗后的胰腺癌肝转移现象起到促进的作用。
既然这两种细胞都是肿瘤免疫微环境的重要组成部分，那么，它们是不是通过对CD8+ T细胞的影响来调控转移现象的呢？
然而，Schmid团队的检测结果却发现，无巨噬细胞的转移灶中呈现CD8+浸润以及功能障碍，而中性粒细胞清除却对CD8+ T细胞没有产生任何影响。

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删除中性粒细胞不影响杀伤T细胞的浸润，而删除巨噬细胞会提高杀伤T细胞浸润
如果中性粒细胞不是通过CD8+T细胞来影响微环境，那么，它又是通过什么机制来达到调控肿瘤细胞的转移呢？
一个可能的解释是，它可以直接调控转移灶内肿瘤细胞的生长！
为了进一步验证这个猜想，Schmid团队从接受/不接受化疗的肝转移灶中分离出中性粒细胞，然后用它们跟胰腺癌细胞共培养。让人吃惊地是，与从化疗药治疗后的转移灶中分离出的中性粒细胞共培养，癌细胞可以形成克隆，而其他条件均不可以。
这一结果验证了中性粒细胞可以直接作用于肿瘤细胞上，产生促进转移灶形成的猜想。

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与化疗后的肝转移灶内的中性粒细胞共培养能够提高肿瘤细胞的克隆形成，而与不经过化疗药处理的中性粒细胞共培养却减弱了其克隆形成的能力
接下来，Schmid团队进一步验证中性粒细胞影响肿瘤细胞生长的机制。
通过比较接受/不接受化疗的转移灶中的中性粒细胞的转录组，他们发现Gas6的表达量有非常大的差异，而且以前已经有报道证实胰腺癌细胞高表达Gas6的受体AXL[3] 。
通过对化疗后肝转移灶的组织染色，Schmid团队也证实 Gas6在转移灶的中性粒细胞富集区域表达量很高，而在无中性粒细胞的状态下， Gas6的表达量明显下降。
然后他们通过体外实验也发现，化疗后肝转移灶内的中性粒细胞能够促进化疗药刺激的肿瘤细胞的生长，而Cas6的中和抗体可以抑制这种促肿瘤现象。
Schmid团队也检测了Gas6的受体AXL在化疗后转移灶的表达量变化。
AXL在化疗后的转移灶中的磷酸化程度明显增高，而在无中性粒细胞的状态下， AXL的激活明显下降。同样，用Gas6/AXL信号通路的阻断剂华法林和R428 ，均能够有效地降低化疗后复发的转移癌负荷。

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Gas6/AXL信号的阻断剂（华法林和R428）可以减轻化疗后的肝转移负荷，并延长生存期
最后，Schmid团队回到临床去找验证。
考虑到临床大夫只会在化疗之前获取胰腺癌患者的肝组织进行诊断检测。而对于四期结直肠癌患者（已出现肝转移），他们会将化疗作为常规的新辅助治疗方案，再实施手术切除转移灶[4] 。因此他们选择了四期结直肠癌的肝转移样本进行研究。
结果与临床前的动物实验非常吻合，更多的中性粒细胞会聚集和包围在化疗后的肝转移灶周围，同时， Gas6也高表达在中性粒细胞富集的区域。