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2.2各组大鼠海马组织PERK、eIF2α磷酸化水平比较
异氟醚组大鼠海马组织PERK、eIF2α磷酸化水平高于GSK组及对照组(P<0.05) 。 见表2、图1 。
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2.3各组大鼠海马组织GRP78、CHOP水平比较
异氟醚组大鼠海马组织GRP78、CHOP水平高于GSK组及对照组(P<0.05) 。 见表3、图2 。
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2.4各组大鼠海马组织神经元细胞凋亡率比较
异氟醚组大鼠海马组织神经元细胞凋亡率高于GSK组及对照组(P<0.05) 。 见图3、4
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2.5各组大鼠海马组织Bax、Bcl?2水平比较
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异氟醚组大鼠海马组织Bax水平高于GSK组及对照组 , Bcl?2水平低于GSK组及对照组(P<0.05) 。 见表4、图5、6
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【异氟醚通过激活PERK/eIF2α通路诱导神经元凋亡和ERS在PND中的作用机制】3讨论
本研究为分析ERS在异氟醚诱导PND中的作用 , 使用吸入异氟醚建立PND模型 , 并使用PERK抑制剂抑制PERK/eIF2α通路的激活 , 结果显示:建模后大鼠的逃避潜伏期显著升高而穿越平台次数和目标象限停留时间显著减少 , GSK组的逃避潜伏期显著低于异氟醚组 , 而穿越平台次数和目标象限停留时间显著长于异氟醚组;异氟醚组大鼠海马组织PERK和eIF2α磷酸化水平显著高于对照组 , 而GSK组PERK和eIF2α磷酸化水平显著低于异氟醚组 。 PERK/eIF2α通路中蛋白磷酸化水平的提高是ERS激活的主要通路之一 。 这提示异氟醚诱导的PND大鼠模型的神经功能受损与ERS的激活有关 , 而使用PERK抑制剂具有保护PND大鼠神经功能的作用 。
为进一步分析PND模型中ERS影响神经功能的机制 , 本研究检测了ERS下游标志蛋白和海马组织神经元细胞凋亡水平 。 研究表明PERK通路的激活会通过ERS诱导细胞凋亡 。 在ERS激活的过程中 , 许多ERS相关蛋白(主要包括GRP78和CHOP)水平升高 。 GRP78是热休克蛋白家族的成员 , 从肌醇酶?1裂解而来 , 具有促进蛋白质折叠作用 , GRP78水平的升高是ERS的标志 。 此外 , 激活的肌醇酶?1也可以通过促进X?box结合蛋白1成熟并促进折叠蛋白反应(UPR)靶基因(如CHOP)上调 , 并通过caspase?12和caspase?3途径直接诱导细胞凋亡 。 本研究结果显示:异氟醚组大鼠海马组织GRP78、CHOP水平及神经元细胞凋亡率显著高于对照组及GSK组 , 海马组织Bax水平显著高于对照组及GSK组 , Bcl?2水平显著低于对照组及GSK组 。 Tang等的研究显示 , PERK途径引起的ERS会促进抑郁症模型小鼠海马组织神经元细胞凋亡 , 抑制PERK/eIF2α通路则可缓解神经元细胞凋亡 。 这说明抑制PERK/eIF2α通路引起的ERS会通过调节凋亡相关蛋白表达 , 从而抑制海马组织神经元细胞凋亡 , 对PND大鼠模型的神经功能起到保护作用 。
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