特立帕肽注射液人体等效性研究现状分析及相关考虑( 二 )

1、研究类型
根据特立帕肽作为结构简单的小分子多肽具有的半衰期短和免疫原性低的特点（稳态浓度下， 20μg ，每日给药一次），建议采用随机、交叉对照、单次给药的试验设计，洗脱期通常不少于24小时，一般可设计为1~2天。
欧洲药品管理局（EMA）已上市的特立帕肽生物类似药（livogiva）的公共审评报告[5]当中， PK研究部分Cmax和AUC各自的个体内变异系数如下所示：

文章图片
如图所示， Cmax和AUC各自的个体内变异系数均未超过30% ，因此认为该品种无个体内高变异的特征，故PK等效研究推荐在健康男性或女性志愿者中进行一项随机、开放、两制剂、两周期、双交叉的试验。
2、采血点和洗脱期设计
根据原研FDA说明书[6]可知，特立帕肽在皮下注射后被吸收，皮下注射20μg剂量后在大约30分钟后达到峰值血清浓度， 3小时内降至不可量化的浓度。通过皮下注射给药时，血清中特立帕肽的半衰期约为1小时。原研资料以及文献研究中特立帕肽的药代动力学参数如下：

文章图片
根据上述PK参数，生物等效研究采血点设计时需关注达峰时间范围以及半衰期，科学地设计采血点以满足生物等效性研究的需要。根据原研相关资料和文献数据，特立帕肽的Tmax中位值集中在0.1667~0.5h（10~30min），极值范围为0.083（5min）-3.50h ，因此可在该达峰范围内科学的设计采血点；特立帕肽半衰期的极大值约为1.4h ，根据相关文献，血药浓度最后可测的点为2.58±0.707h[10] ，故采血终点可设为5h ，以满足法规对于采血终点不短于3个末端消除半衰期的要求。
3、剂量及给药途径
选择的给药剂量应能敏感地分辨候选药和参照药PK特征差异。指导原则推荐的给药剂量为20μg ，通过皮下注射途径进行注射给药，选择统一的注射部位。根据说明书规定的临床给药方式，在腹部或大腿进行注射， BE研究中可考虑腹部。给药过程的标准化管理是BE研究的关键。
4、样本量设计
据指导原则推荐，试验前需充分估计所需的样本量，通常α取双侧0.1（双单侧0.05），检验效能为80% 。样本量估算时应充分考虑个体内变异和原研药既往信息药代参数变异情况等。根据法规要求，计算正式试验样本量列表如下：

文章图片
参考CDE备案信息，所有登记临床试验的企业空腹试验均采用两周期、两序列交叉设计，样本量为28~76例不等，提示本品PK等效试验样本量与两制剂间差异以及个体内变异相关。预试验可以为正式试验的例数提供较为可靠的参考，建议申办方根据不低于80%的检验功效并预设较为保守的GMR进行正式试验样本量的估算和确定。
5、检测物质及难度
该品种生物等效评估基于血浆中特立帕肽的浓度，在推荐的给药剂量20μg下，血浆中特立帕特的Cmax的均值范围为78.21~227pg/mL ，根据相关文献[9-10]研究，生物分析检测的定量下限需达到6-10pg/mL左右的水平才可以较为准确的定量特立帕肽的血药浓度，同时药物在血浆中稳定性不佳，因此本品种生物分析对方法学的灵敏度和特异性要求较高，推荐在试验开展之前对分析方法学进行充分的验证。
6、生物等效性评价
PK比对研究主要终点指标的选择是等效性评价的关键。根据口服固体制剂的相关指导原则， AUC0-∞和Cmax是判断生物等效性的主要参数，因此推荐AUC0-∞和Cmax作为主要终点指标， AUC0-t、tmax、Vd和t1/2作为次要研究终点重点进行比较分析，等效性界值设定为80.00%-125.00% 。