郑勤龙主任：系统梳理儿童淋巴瘤分子检测的意义与方法

随着对淋巴瘤发病机制探索的不断深入，尤其是在分子层面的挖掘逐渐加深，我们愈加体会到分子检测在精准诊断、分层治疗、预后评估、复发监测等全程管理中举足轻重的作用。近期召开的“全国儿童淋巴瘤协作组（CNCL）第十三期培训暨学术会议”中，高博诊断中心分子实验室郑勤龙主任带来了“儿童淋巴瘤的分子诊断及预后意义”精彩主题报告，围绕儿童淋巴瘤分子检测的必要性、检测技术和内容选择、对疾病诊治的临床意义等方面展开了深度解读，帮助大家全面、深刻理解分子诊断的最新进展和重要价值。
为什么需要分子检测？
——精细分子分型，精准导航治疗
非霍奇金淋巴瘤（NHL）是儿童淋巴瘤中主要的病理类型，其中伯基特淋巴瘤（BL）、淋巴母细胞淋巴瘤（LBL）、弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）和间变性大细胞淋巴瘤（ALCL）分别约占儿童NHL的40%、30%、15%和10% ，其他还包括原发性纵隔大B细胞淋巴瘤（PMBL）、滤泡性淋巴瘤（FL）等少见类型。
分子遗传学异常是淋巴瘤发生发展的重要驱动因素。以B细胞淋巴瘤为例，从造血干细胞到记忆B细胞或浆细胞的整个发育、分化过程中，如果任何一个环节出现了异常，都可能导致淋巴瘤的发生。随着分子生物学的发展，学术界对淋巴瘤分子致病机制的认识日益深入（图1）。

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图1一些常见淋巴瘤已知的分子致病机制
儿童淋巴瘤在组织病理形态学方面的特征与成人总体相似，但分子特征差异较大。以FL为例，成人患者多伴有表观遗传学改变，或IGH与BCL-2融合造成细胞不凋亡；但儿童患者IGH与BCL-2融合较少见，多携带TNFRSF14突变，生物学行为偏惰性、预后较好，一般可保守治疗。 DLBCL中，儿童患者多为生发中心来源（GCB型），而ABC型少见。可见，在同一种淋巴瘤中，儿童与成人分子机制有些往往大相径庭，导致预后和治疗策略迥异。
从世界卫生组织（WHO）、国际共识分类（ICC）等对淋巴瘤分型的更新中可以看到，分子检测愈加重要，通过MICM整合诊断、精细分子分型，能够为临床提供更精准的预后预测和治疗指引。
全面考虑检测内容
合理选择检测技术和方法
淋巴瘤分子异常的常见类型包括染色体异常（结构、数量）、融合基因/大片段基因缺失、基因变异（单个或多个碱基异常，如突变、缺失或插入、扩增/复制、多态性变异）、基因表达异常等。选择分子检测内容时需要全面考虑，以免导致漏检和诊断不准确。检测手段主要有聚合酶链反应（PCR）、毛细管电泳（CE）、二代测序（NGS）等。
NGS在临床的应用日益广泛，逐渐成为分子检测的“主力军” ，具体临床检测实践中需要做多方面的技术考量。全基因组测序（WGS）、全外显子组测序（WES）、全转录组测序（WTS）数据量庞大、临床验证难度较大，目前更多采用特定的panel检测。 Panel的准确、合理选择对于分子诊断的预期目的和结果至关重要。
除了NGS以外， PCR、一代测序、染色体微阵列、多重链接依赖式探针扩增（MLPA）也可用于淋巴瘤基因变异检测，需根据拟检测的变异类型优选技术（表1）。
【郑勤龙主任：系统梳理儿童淋巴瘤分子检测的意义与方法】表1淋巴瘤基因变异常见类型及分子检测方法

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贯穿诊疗各环节
助力淋巴瘤全程管理
随着研究数据的积累、淋巴瘤生物标志物的种类和意义不断丰富，分子检测的价值也随之持续拓展，其应用目前已贯穿了诊断、分型、治疗指导、疗效和预后评估、复发监测等疾病全程管理的各个环节（图2）。