sgRNA|在iPS中利用CRISPRi系统发现病毒感染新机制——NEPA21高效基因转染系统助力( 二 ) 结果|细胞|系统|基因|研究|抑制

最后，该研究团队检测了 TMRPSS2 和 CTSB 的双重敲降机制对于 ACE2 iPS 的 SARS-CoV-2 感染的影响作用。结果发现，感染的 CTSB 和 TMPRSS2 双基因敲降细胞中的病毒 RNA 拷贝数低于感染的单基因敲降细胞中的病毒 RNA 拷贝数，如下图所示。

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CRISPR/Cas9基因编辑系统可以使用转录阻遏物结构域（KRAB）和短引导RNA（sgRNA）融合的降解蛋白Cas9（dCas9）选择性地抑制靶基因的表达。 CRISPRi和iPS的组合可以将靶基因的表达抑制到1%或更低。此外，在由iPS诱导的体细胞中，该表达也保持低水平。到目前为止，利用iPS衍生的体细胞进行的SARS-CoV-2研究已得到广泛开展。
值得一提的是，为了进行CRISPRi实验，该研究团队使用来自NEPA GENE的NEPA21高效基因转染系统，并最终获得了成功理想的实验结果。

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NEPA21高效基因转染系统采用独特设计的电转程序，可应用细胞、离体组织或动物活体的转染。配合独有的电压衰减（Voltage/Decay）设计，可在获得高转染效率的同时，提高细胞存活率。专门针对难转染的原代免疫细胞、干细胞、神经细胞、活体动物、受精卵及宫内胚胎等转染。目前已有众多应用文献发表在高水平学术期刊，是基因编辑、细胞免疫等前沿生物研究中的首选品牌！
特点
1：采用全新设计的电转程序，电压衰减（Voltage Decay）模式；基因导入+反向导入模式；
2：不需要特殊转染试剂辅助，节省实验成本；
3：电转程序中的各项参数实时可见、可调，特别适用于优化原代细胞、非常见细胞的电转参数。
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