一双“慧眼”看穿冻卵活性，拉曼光谱的确“靠谱”( 四 )

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图6从指纹光谱区域获得的在-25℃条件下冷冻在PG溶液中的卵母细胞中脂滴的拉曼谱图（图源：[1]）
注：（a）有序状态的脂质拉曼图（IOL）；(b)IC=C/IC=O比率的空间分布；(c)多变量分析得出的指纹区域中的光谱成分；(d)IC=C/IC=O比率分布的直方图。
此项研究使用显微拉曼光谱成像技术来揭示了冷冻过程中卵母细胞内LD的脂质相分离现象。并使用甘油和丙二醇作为冷冻保护剂进行卵母细胞冷冻实验，实验结果证实脂质在LD内按照不同脂质不饱和度进行分布，研究数据还表明，饱和脂质可能在LD表面发生LPT ，而不饱和脂质是在LD核心处保持着无序的液相状态。
在许多哺乳动物中， LD会影响细胞活性，细胞内脂质的增加量是胚胎冷冻保存成功的主要限制。尽管几十年来已经研究了高脂质含量的卵母细胞和植入前胚胎的冷冻保存问题，但富含脂质的卵母细胞和胚胎的冷冻损伤研究仍然很少。在温度升高到LPT开始以后的脂质重新分布对细胞的作用仍不清楚。在有序相熔化后， LD内的大多数脂质很有可能都混合到均匀的混合物中。然而，冷冻后混合脂质所需的时间是未知的，需要更多的研究来揭示脂质再分布的不同方面及其对冷冻保存后细胞存活和发育的影响。脂质再分配的作用可以在细胞解冻后立即在细胞存活和脂质代谢中发挥重要作用。拉曼光谱似乎是研究生物细胞中LPT的一种前瞻性方法，可提供有关微米级脂质分布的信息。此项研究证明拉曼为研究与LD相关的低温损伤机制以及制定减轻这些损伤的策略开辟了新的可能性。
撰文|文竞择
排版|乔维钧
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参考资料：
[1]MokrousovaVI,OkotrubKA,AmstislavskySY,etal.Ramanspectroscopyevidenceoflipidseparationindomesticcatoocytesduringfreezing.Cryobiology.2020Aug;95:177-182.doi:10.1016/j.cryobiol.2020.03.005.Epub2020Mar11.PMID:32171795.
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