无需传统病毒载体|总编辑圈点

本文转自:科技日报
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一种使用CRISPR生产大量细胞用于治疗的新方法 。 图片来源:格莱斯顿研究所
无需传统病毒载体|总编辑圈点】科技日报采访人员张梦然
据《自然·生物技术》杂志日前发表的论文 , CRISPR-Cas9基因编辑系统的新改进 , 使设计用于治疗的大量细胞变得更加容易 。 美国格莱斯顿研究所和加州大学旧金山分校开发的新方法 , 能以非常高的效率将特别长的DNA序列引入细胞基因组中精确位置 , 而无需传统的病毒递送系统 。 该成果是向下一代安全有效的细胞疗法迈出的一大步 。
格莱斯顿研究所最新证明 , 新方法可在一次运行中设计超过10亿个细胞 , 这远高于治疗个体患者所需的细胞数量 。
此前人们已知DNA可单链或双链存在 , Cas9附着在双链DNA上 。 研究发现 , 高水平的双链DNA模板会对细胞产生毒性 , 因此该方法只能用于少量模板DNA , 导致效率低下 。
但即使在相对较高的浓度下 , 单链DNA对细胞的毒性也较小 。 鉴于此 , 研究团队研发了一种将修饰的Cas9酶连接到单链模板DNA的方法 , 即在末端添加一小段双链DNA突出端 。
与旧的双链方法相比 , 单链模板DNA可将基因编辑效率提高一倍以上 。 分子的双链末端让研究人员可使用Cas9来增强非病毒载体向细胞的传递 。
现在 , 研究人员可以使用新的DNA模板生成超过10亿个针对多发性骨髓瘤的CAR-T细胞 。 CAR-T细胞是经过基因改造的免疫T细胞 , 可有效对抗特定细胞或癌症 。 使用新的单链Cas9定向模板 , 大约一半的T细胞获得了新基因 , 并因此转化为CAR-T细胞 。
此外研究还表明 , 新方法首次可完全替换与罕见遗传免疫疾病相关的两个基因——IL2RA和CTLA4基因 。 这种“一刀切”的方法可治疗这些基因中具有不同突变的许多患者 , 而不必为每个患者的突变生成个性化模板 。 用这种基因工程方法处理的细胞中 , 有近90%获得了健康版本的基因 。
总编辑圈点
工欲善其事 , 必先利其器 。 基因编辑系统作为生命科学领域的重要研究工具 , 一直在不断进化升级 。 早些年 , 锌指酶是比较流行的基因编辑工具 。 如今在生命科学界提起基因编辑 , 几乎无人不知CRISPR系统的大名 。 凭借其便捷易用的优势 , 近年来CRISPR系统在遗传疾病治疗、药物研发、种子培育等多个细分领域促成了众多以往不敢想象的研究成果 。 与此同时 , 针对CRISPR系统自身进行改进的研究也捷报频传 。 得益于此 , 科学家手中的基因编辑“剪刀”正变得更加精准、高效、强大 。