CD：终于找到了！科学家发现阻挡T细胞进入肺癌的两个关键细胞亚型！( 二 )

由于ADH1B+CAF主要分布于早期NSCLC中，而FAP+CAF主要分布于晚期NSCLC中。研究团队为揭示NSCLC进展过程中成纤维细胞的转录组改变，他们分析了ADH1B+CAF、FAP+CAF和两类正常肺组织成纤维细胞（PI16+fib.和alv.fib.）的转录特征。
他们发现FAP+CAF高表达CAFs活化相关基因COL1A1、COL3A1、BGN ，低表达正常肺泡成纤维细胞标志物TCF21、MME（CD10）、ELN；而ADH1B+CAF能表达正常肺成纤维细胞（PI16+fib.和alv.fib.）的标志物， ADH1B+CAF中的FAP+CAF活化相关基因表达水平中等。
多重荧光免疫组化染色结果也显示， ADH1B+CAF主要位于肿瘤侵袭前沿， FAP+CAF主要位于肿瘤中心，部分CAF同时存在这两类细胞的标志物表达。
有趣的是，单细胞测序结果也提示， ADH1B+CAF兼具PI16+fib和FAP+CAF的转录特征。
这些结果都提示：ADH1B+CAF可能是一种来源于PI16+fib的低活化水平的成纤维细胞。

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ADH1B+CAF和FAP+CAF的转录特征
为了验证ADH1B+CAF和FAP+CAF区分NSCLC分期的能力，研究团队利用单细胞测序数据提取了ADH1B+CAF和FAP+CAF的基因特征，使用TCGA数据集进行验证。
对TCGA数据的分析表明， ADH1B+CAF基因特征在早期肿瘤、肺腺癌（LUAD）和LUAD乳头型中富集，而FAP+CAF基因特征在晚期肿瘤、肺鳞癌（LUSC）和LUAD实体型中富集。
这些结果提示NSCLC中成纤维细胞分子分型可以用来改进NSCLC的临床分型。
为了探究不同CAFs亚型能否调控肿瘤微环境内免疫浸润，研究团队利用单细胞测序数据对CAFs亚型富集与免疫细胞浸润情况进行分析。单细胞测序数据显示， FAP+CAF与SPP1+单核细胞来源的巨噬细胞， IgG+浆细胞和PD-1+T细胞的富集相关，这一结果与最近报道的肺癌活化模块[16]所描述的免疫细胞类型相似。
值得注意的是，尽管ADH1B+CAF和FAP+CAF与浸润的免疫细胞种类相关，但它们的丰度与T细胞的空间分布无关。
既然这两类CAFs与T细胞排斥无关，那么其他类型的CAFs是否与T细胞排斥有关呢？对MYH11+αSMA+CAF浸润情况分析后发现， MYH11+αSMA+CAF形成单层结构包绕癌巢，能够阻碍T细胞进入肿瘤实质。

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MYH11+αSMA+CAF可以发挥T细胞排斥作用
FAP+αSMA+CAF同样能够发挥T细胞排斥作用，但分布情况与排列方式与MYH11+αSMA+CAF有所不同。 MYH11+αSMA+CAF主要分布于早期肿瘤，在癌巢周围单层排列，而FAP+αSMA+CAF主要分布于晚期肿瘤，在癌巢周围呈多层或片状分布。

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FAP+αSMA+CAF可以发挥T细胞排斥作用
研究团队进一步探究了这两类有T细胞排斥功能的CAFs亚群，在细胞外基质重塑方面的作用。
结果显示，这两类CAFs亚群都能通过产生胶原来重塑细胞外基质，其中MYH11+αSMA+CAF主要产生IV型胶原，而FAP+αSMA+CAF主要产生XI和XII型胶原。

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MYH11+αSMA+CAF和FAP+αSMA+CAF产生不同类型的胶原纤维
总而言之，该研究鉴定了NSCLC的4种CAFs亚群，及不同CAFs亚群与免疫细胞空间分布的关系。
首先，研究团队发现ADH1B+CAF和FAP+CAF与NSCLC组织学亚型和肿瘤分期相关，这有助于对NSCLC亚型进行精确的分子分型。
其次，研究团队鉴定了1种与抗原呈递相关的CAFs亚型ADH1B+CAF ，促进CAFs向这种亚型分化可能有助于提高抗肿瘤免疫疗效。
第三，研究团队发现FAP+CAF与NSCLC中的T细胞分布模式无关，这可能是靶向FAP+CAF的治疗策略失败的原因。