浅谈化学药品注射剂细菌内毒素

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作者｜梦幻今朝
整理｜药研
一、细菌内毒素概述
细菌内毒素是是革兰氏阴性菌的细胞壁成分，当细胞死亡或自溶后便会释放出内毒素，如果被大量注射进入血液时可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等反应——又叫“热原反应” 。因此，在注射剂中需严格控制细菌内毒素。
二、如何制定化学药品注射剂细菌内毒素限度
化学药品注射剂细菌内毒素限度制定思路：
①根据《中国药典2020年版》1143细菌内毒素检查法中公式L=K/M计算得出限度，其中L为供试品的细菌内毒素限值， K为人每千克体重每小时最大可接受的内毒素剂量， M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量；
②结合《中国药典2020年版》9251细菌内毒素检查法应用指导原则要求；
③查找各国药典（如美国药典、英国药典、日本药典）以及进口注册标准收载的该产品细菌内毒素要求。
综上，选择最严格的细菌内毒素要求作为本品的限度值。
三、化学药品注射剂细菌内毒素带入途径
（1）原辅料本身的细菌内毒素
在注射剂中细菌内毒素贡献占比最大，需要根据产品的细菌内毒素来计算控制原辅料的细菌内毒素。
（2）直接接触产品的内包材
直接接触产品内包材如西林瓶、胶塞、安瓿等，在生产使用时会要求除去细菌内毒素并进行验证，验证标准是内毒素能够降低3个log值。在产品细菌内毒素贡献占比较小。
（3）从容器、用具、管道和装置等带入
按照GMP规定对生产时所有接触药品的工器具等需按照要求进行清洗，并用适宜的方法除去细菌内毒素和灭菌并进行清洗验证。在产品细菌内毒素贡献占比较小。
（4）保存时间
药液在配制生产中有可能微生物会增长进而引起细菌内毒素增加，因此需要对生产时限进行考察并进行验证，还有药品在稳定性放置期间也有可能使细菌内毒素增加，也需进行考察。
综上，在药学研发过程中我们需要重点控制原辅料带入的细菌内毒素，其他带入途径可按照现行GMP要求在生产中进行控制，原辅料带入的细菌内毒素越低，成品的细菌内毒素就越低。
四、对于化学药品注射剂细菌内毒素限度较高的产品如何控制
对于注射剂细菌内毒素限度较高的产品来说，我们采取产品组分的贡献结合生产线的贡献来综合评估控制策略，其中原辅料贡献占比最大，我们会通过产品的细菌内毒素计算控制原辅料的细菌内毒素。
如假设某注射剂产品规格为4ml:10mg ，制定的产品细菌内毒素是80EU/ml ，其单支处方组成如下：

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对于注射用水可以按照中国药典要求进行细菌内毒素为0.25EU/ml ，盐酸和氢氧化钠分别为强酸和强碱会破坏细菌内毒素，不需进行控制，氯化钠和抗氧剂细菌内毒素可结合辅料供应商实际情况进行制定，可控制为5.0EU/g 。对于原料药来说，可用产品的细菌内毒素减去辅料、内包材、工器具贡献的细菌内毒素得到，因此，一般会控制原辅料的细菌内毒素贡献值低于产品的细菌内毒素，如本品最大可控制原料药细菌内毒素为31EU/mg ，可有效降低制剂中细菌内毒素超标的风险，各组分的细菌内毒素控制水平如下表：

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综上，控制原辅料带入的细菌内毒素进而控制成品的细菌内毒素水平。
五、对于注射剂细菌内毒素限度较低的产品如何进行控制