Hydromer亲水涂层具有降低血栓形成性、细胞增殖和蛋白质吸附性( 五 )

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图7
图7：T8B涂层聚氨酯管的长期暴露。柠檬酸盐全人血在室温下通过未涂覆的(A)和t8b涂层（B ，仅管腔）聚氨酯管（7.5厘米长）循环8小时，然后在48℃下保存16小时。每天更换血液，共计12天。然后用PBS洗涤试管，用考马斯亮蓝染色，并在3800处的显微镜下检查。
如图7(A)所示，血液成分（细胞和蛋白质）附着在未涂层的管道表面。相比之下，被DualityTMT8B包覆的表面对血液蛋白的吸附显著减少[图7(B)] 。用高盐（0.5M）处理从每个管腔内去除蛋白质，用布拉德福德蛋白法测定。
我们发现在涂层管表面吸附的蛋白质平均减少了70% 。然而，我们不能排除残留的变性蛋白不能从涂层表面去除的可能性，因此不包括在我们的测量中。由于该配方是为医疗用途而设计的，因此评估该材料应用于表面后的细胞毒性是重要的，因此是必要的。将Dualitytmt8b涂层管或不锈钢提取到带有血清的完全组织培养基中，然后使用小鼠L929成纤维细胞在标准的细胞毒性方案（ISO10993）中进行测试。

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表1
表一：DualityTMT8b涂层聚氨酯管对红细胞溶血的影响
全血在室温下泵入未涂布和涂层聚氨酯管（ID53mm ， OD54.0mm ，长度5180mm），指定时间， 30mL柠檬酸全血2mL/min 。在分析时，血液被离心，得到的血浆稀释1：10 。然后在540nm处测量吸光度，以估计红细胞溶血情况。纳入未暴露于试管的对照组血液进行比较。 a这个时间框架代表血液被泵入管子，然后在一个周末储存。
暴露于细胞72小时后，没有细胞毒性（数据未显示）。在单独的实验中，全血在涂层管的管腔内孵育24小时，并检查合成的血浆中血红蛋白的释放。然后再次加入新鲜血液，孵育24小时，重复该序列长达12天（表1）。在本研究过程中，对照聚氨酯管和涂有DualityTMT8B的管之间的红细胞溶血率没有显著差异。
8、讨论
在本研究中，我们使用电抛光医用级不锈钢和聚氨酯管作为基底，以评价DualityTMT8B配方在降低人血细胞成分表面粘附和HUVEC增殖方面的有效性。血管平滑肌细胞是血管壁的主要组成部分，其增殖在动脉闭塞（再狭窄）和动脉粥样硬化的发展中起着关键作用。 “药物洗脱”支架的开发大大降低了再狭窄的发生率，并在其上加入了药物，以减少或防止组织生长。
在本研究中，我们使用了一个内皮细胞系来评估DualityTMT8B在减少细胞增殖方面的有效性。在这方面，人们发现这一提法非常有效。这些研究中一个重要的区别是，这种减少的细胞增殖是使用一种不使用有丝分裂抑制剂的配方来完成的，该抑制剂本身是具有细胞毒性的。
医用植入物表面的血小板相互作用可能是导致血栓形成的主要因素。事实上，据报道，血小板活化是这方面的一个重要因素。肝素涂层支架的使用，以及其他药物的使用， 1,6-7已被报道可以有效地降低血栓生成的潜力。此外，肝素也被证明可以有效地减少血小板对从氧合器中去除的聚丙烯中空纤维的粘附。
在涂有亲水性润滑聚合物21的聚乙烯表面也观察到类似的结果，血小板粘附降低了超过100倍，纤维蛋白原降低了[60%] 。血小板粘附也被报道在炎症性疾病的发展发展中起着关键作用。血小板与颈动脉血管内皮的粘附可触发动脉粥样硬化病变的形成。
然而，目前尚不清楚这一系列相同的事件是否会发生在体内植入的医疗设备上。其他材料或化学/生物制剂减少血小板和/或蛋白质在表面粘附的能力。例如，涂在不锈钢上的氧化钛也被报道具有生物相容性，并能有效地减少血小板的粘附。将聚（富马酸丙烯-共乙二醇）组成的水凝胶薄膜铸造在玻璃盖上，使用111铟辛标记的血小板在静态条件下评估血小板粘附情况。在这些条件下，与对照组相比，水凝胶表面的血小板粘附明显下降。聚氨酯被广泛应用于各种医疗应用，包括导管、血液透析管和其他设备。