细胞|JITC：香港中文大学于君团队发现胃癌免疫治疗新靶点( 三 ) 基因|组织|生存率|患者|肿瘤

由于干扰素γ（IFNγ ）由活化的淋巴细胞分泌[4] ，因此，研究人员进一步检测了肿瘤组织中IFNγ的表达水平。与YTN16-sgNC组肿瘤组织相比， YTHDF1基因敲除组肿瘤组织中的IFNγ显著升高。有趣的是，通路富集分析显示， YTN16细胞YTHDF1敲除后， IFNGR1是JAK-STAT信号通路中的上调最明显的基因，并且在胃癌细胞株中发现， YTHDF1缺失使IFNGR1、JAK1、JAK2和STAT1蛋白表达上调。以上结果表明， YTHDF1基因敲除使IFNGR1上调进一步激活JAK-STAT1通路，从而增强肿瘤免疫监视。

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肿瘤细胞中YTHDF1的缺失激活了适应性抗肿瘤免疫
从上文可知，肿瘤细胞中敲降YTHDF1表达后可增强适应性T细胞抗肿瘤免疫，那么， YTHDF1表达情况对肿瘤内的免疫抑制细胞有何影响呢？
髓源性抑制细胞（MDSCs）是一种具有免疫抑制能力的肿瘤浸润性免疫细胞，越来越多的证据表明， MDSCs的高浸润性与不良预后和治疗耐药有关[5] 。于是，研究人员通过流式细胞术检测了YTN16肿瘤组织中的MDSCs浸润情况后发现，与YTN16-sgNC组肿瘤组织相比， YTHDF1基因敲除组肿瘤组织和浸润性免疫细胞中的MDSCs比例更低。
适应性抗肿瘤免疫主要依赖于树突状细胞（DC）， DC将肿瘤细胞的抗原呈递给T淋巴细胞，前面结果已证实，肿瘤细胞敲降YTHDF1表达后可促进适应性T淋巴细胞的浸润。那么， YTHDF1敲降后是否也会增加DC浸润呢？
于是研究人员也观察了C57BL/6小鼠肿瘤组织中DC的浸润情。结果显示， YTHDF1基因敲除组肿瘤组织中浸润性DC的比例明显高于YTN16-sgNC组，且DC表面组织相容性复合体II类分子（MHCII）表达增高， MHCII表达是DC细胞成熟的基本特征，而成熟的DC可分泌白细胞介素-12（IL-12）以增强适应性抗肿瘤免疫。随后，研究发现， YTHDF1基因敲除组肿瘤组织中IL-12明显高于YTN16-sgNC组。此外，在TCGA队列中， DC肿瘤浸润与YTHDF1 mRNA表达呈负相关。

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肿瘤细胞中YTHDF1缺失可招募成熟树突状细胞
以上这些结果表明，肿瘤细胞中YTHDF1缺失可诱导成熟DC的募集，从而促进CD4+T细胞和CD8+T细胞的浸润，并增加细胞毒性细胞因子IL-12的分泌。
研究团队为了进一步评估肿瘤组织中YTHDF1的表达是否会影响全身抗肿瘤免疫应答，他们在同一小鼠身上接种了YTN16-sgNC细胞和敲降YTHDF1表达的稳转细胞YTN16-sgYTHDF1-1 。随后根据接种情况不同，研究人员将小鼠分成了3组，分别是YTN16-sgNC组、YTN16-sgYTHDF1-1组和混合组。在YTN16-sgNC和YTN16-sgYTHDF1-1组中，都是将同一细胞分别接种到小鼠的两侧。而在在混合组中，则是将YTN16-sgNC和YTN16-sgYTHDF1-1细胞分别接种到同一小鼠的左侧和右侧。
结果显示，接种8周后， YTN16-sgNC组有肿瘤生长， YTN16-sgYTHDF1-1组无肿瘤生长；而混合组小鼠两侧均有肿瘤生长，但右侧肿瘤体积明显小于左侧，蛋白印迹实验证实了sgYTHDF1-1肿瘤保留了YTHDF1蛋白的丢失。这表明， YTN16-sgNC肿瘤可能导致抗肿瘤免疫的系统性抑制，反过来又允许YTN16-sgYTHDF1-1肿瘤存活。

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3组小鼠接种后，肿瘤体积变化情况
既然YTHDF1缺失可消除具有免疫活性宿主中的肿瘤，那么接下来研究人员猜想它是否能触发持久的全身性抗肿瘤免疫反应，从而阻止未来的肿瘤植入？于是他们将小鼠分为两组，分别将YTN16-sgNC细胞和YTN16-sgYTHDF1-1细胞接种到小鼠的右背侧，接种2周后，切除右背侧肿瘤，然后将YTN16-sgNC细胞注射到左侧。结果显示，之前接种YTN16-sgNC细胞组小鼠左侧有肿瘤生长，之前接种YTN16-sgYTHDF1-1细胞组未见肿瘤生长。这些结果表明，接种YTN16-sgYTHDF1-1细胞后的小鼠，可充分触发宿主的抗肿瘤免疫，从而阻止随后接种表达正常YTHDF1细胞的肿瘤植入。